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13280218053更新時間:2024-10-24
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在實驗室分析工作中,當(dāng)我們拿到一個樣品,該怎樣如何定性和定量新品技,因此建立一套完整的分析方法是關(guān)鍵,下面介紹一些常規(guī)的步驟:
1性能穩定、樣品的來源和預(yù)處理方法
氣相色譜能直接分析的樣品須是氣體或液體,固體樣品在分析前應(yīng)當(dāng)溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲幸幠?,而且還要保證樣品中不含氣相色譜不能分析的組分(如無機鹽)數字化,可能會損壞色譜柱的組分。這樣作用,我們在接到一個未知樣品時開展攻關合作,就須了解的來源,從而估計樣品可能含有的組分互動式宣講,以及樣品的沸點范圍組建。如能確認(rèn)樣品可直接分析。如果樣品中有不能用GC直接分析的組分結構,或樣品濃度太低深入交流研討,就要進行必要的預(yù)處理,包括采用一些預(yù)分離手段效果較好,如各種萃取技術(shù)集聚效應、濃縮和稀釋方法、提純方法等廣泛應用。
2節點、確定氣相色譜儀配置
所謂配置就是用于分析樣品的方法采用什么進樣裝置、配什么載氣要求、安裝什么色譜柱以及什么檢測器。
3、確定初始操作條件
當(dāng)樣品準(zhǔn)備好開放以來,且儀器配置確定之后等形式,就可開始進行嘗試性分離。這時要確定初始分離條件組合運用,主要包括進樣量的特點、進樣口溫度、檢測器溫度研究與應用、色譜柱溫度和載氣流速適應性。進樣量要根據(jù)樣品濃度、色譜柱容量和檢測器靈敏度來確定有效保障。樣品濃度不超過mg/mL時填充柱的進樣量通常為1-5uL激發創作,而對于毛細(xì)管柱,若分流比為50:1時稍有不慎,進樣量一般不超過2uL探索。進樣口溫度主要由樣品的沸點范圍決定,還要考慮色譜柱的使用溫度。原則上講全面協議,進樣口溫度高一些有利重要作用,一般要接近樣品中沸點的組分的沸點,但要低于易分解溫度講實踐。
4增幅最大、分離條件優(yōu)化
分離條件優(yōu)化目的就是要在短的分析時間內(nèi)達到符合要求的分離結(jié)果。在改變柱溫和載氣流速也達不到基線分離的目的時,就應(yīng)更換更長的色譜柱系統,甚至更換不同固定相的色譜柱,因為氣相色譜分析中更加廣闊,色譜柱是分離成敗的關(guān)鍵系統性。
5、定性鑒定
所謂定性鑒定就是確定色譜峰的歸屬。對于簡單的樣品損耗,可通過標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照來定性。就是在相同的色譜條件下長遠所需,分別注射標(biāo)準(zhǔn)樣品和實際樣品形式,根據(jù)保留值即可確定色譜圖上哪個峰是要分析的組分。定性時必須注意非常完善,在同一色譜柱上傳遞,不同化合物可能有相同的保留值,所以不斷完善,對未知樣品的定性僅僅用一個保留數(shù)據(jù)是不夠的發揮效力,雙柱或多柱保留指數(shù)定性是氣相色譜分析中較為可靠的方法,因為不同的化合物在不同的色譜柱上具有相同保留值的幾率要小得多。
6穩定發展、定量分析
要確定用什么定量方法來測定待測組分的含量方便。常用的色譜定量方法不外乎峰面積(峰高)百分比法、歸一化法更好、內(nèi)標(biāo)法基石之一、外標(biāo)法和標(biāo)準(zhǔn)加入法(又叫疊加法)。峰面積(峰高)百分比法簡單安全鏈,但不準(zhǔn)確行業分類。只有樣品由同系物組成、或者只是為了粗略地定量時該法才是可選擇的增持能力。相比而言應用領域,內(nèi)標(biāo)法的定量精度,因為它是用相對于標(biāo)準(zhǔn)物(叫內(nèi)標(biāo)物)的響應(yīng)值來定量的醒悟,而內(nèi)標(biāo)物要分別加到標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品中進行部署,這樣就可抵消由于操作條件(包括進樣量)的波動帶來的誤差。至于標(biāo)準(zhǔn)加入法新模式,是在未知樣品中定量加入待測物的標(biāo)準(zhǔn)品,然后根據(jù)峰面積(或峰高)的增加量來進行定量計算。其樣品制備過程與內(nèi)標(biāo)法類似但計算原理則是來自外標(biāo)法各方面。標(biāo)準(zhǔn)加入法定量精度應(yīng)該介于內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法之間堅定不移。
7、方法的驗證
所謂的方法驗證占,就是要證明所開發(fā)方法的實用性和可靠性技術的開發。實用性一般指所用儀器配置是否全部可作為商品購得,樣品處理方法是否簡單易操作更讓我明白了,分析時間是否合理健康發展,分析成本是否可被同行接受等★w躍?煽啃詣t包括定量的線性范圍堅實基礎、檢測限、方法回收率大數據、重復(fù)性前景、重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度等。
山東鑫之恒技術(shù)人員與新客戶溝通時,常問的就是要氣相色譜分析什么樣品長效機製,樣品中還有哪些物質(zhì)等化學(xué)參數(shù),對儀器的配置選擇起到關(guān)鍵作用重要部署。