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應(yīng)如何正確使用液相色譜柱

更新時(shí)間:2024-12-19

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液相色譜柱作為液相色譜分析不可少的分析助手系統性,如何正確操作使用色譜柱合作,避免柱效降低。
避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動(dòng)

溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況損耗;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料勇探新路,因此,在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行形式,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動(dòng)不能過緩擴大。

逐漸改變?nèi)軇┑慕M成

特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬畟鬟f,反之亦然?/span>

色譜柱一般不能反沖

一般來說色譜柱不能反沖讓人糾結,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)發揮效力。否則反沖會(huì)迅速降低柱效全面革新。

使用適宜的流動(dòng)相

選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH)勞動精神,以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱方便,分析柱是鍵合硅膠時(shí)明顯,預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠飽和基石之一,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解基礎上。

用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱

經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)行業分類。在進(jìn)行清洗時(shí)預下達,對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右有序推進。

禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜

保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇適應性,柱接頭要擰緊顯著,防止溶劑揮發(fā)干燥深入開展。 禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長(zhǎng)時(shí)間。

色譜柱損壞及時(shí)處理

色譜柱使用過程中需求,如果壓力升高,一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞,這時(shí)應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗各方面;另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)堅定不移,使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形占,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷技術的開發,死體積增大。在后兩種情況發(fā)生時(shí)更讓我明白了,小心擰開柱接頭健康發展,用潔凈小鋼將柱頭填料取出12mm高度(注意把被污染填料取凈)再把柱內(nèi)填料整平。然后用適當(dāng)溶劑濕潤(rùn)的固定相(與柱內(nèi)相同)填滿色譜柱飛躍,壓平堅實基礎,再擰緊柱接頭。這樣處理后柱效能得到改善大數據,但是很難恢復(fù)到新柱的水平前景。

柱子失效通常是柱端部分,在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱(530mm),可以起到保護(hù)長效機製、延長(zhǎng)柱壽命的作用。采用保護(hù)柱會(huì)損失一定的柱效重要部署,這是值得的等地。通常色譜柱壽命在正確使用時(shí)可達(dá)2年以上集聚。以硅膠為基質(zhì)的填料,只能在pH=29范圍內(nèi)使用大大提高。柱子使用一段時(shí)間后新的動力,可能有一些吸附作用強(qiáng)的物質(zhì)保留于柱頂,特別是一些有色物質(zhì)更易看清被吸著在柱頂?shù)奶盍仙稀?/span>

注意維護(hù)新液相色譜柱

新的液相色譜柱在使用一段時(shí)間后柱頂填料可能塌陷調整推進,使柱效下降為產業發展,這時(shí)也可補(bǔ)加填料使柱效恢復(fù)。每次工作完后橋梁作用,最好用洗脫能力強(qiáng)的洗脫液沖洗文化價值,例如,ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡講故事。當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí)單產提升,使用完后應(yīng)用無鹽流動(dòng)相沖洗。含鹵族元素(氟置之不顧、氯多樣性、溴)的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道,不宜長(zhǎng)期與之接觸試驗。裝在HPLC液相色譜儀上柱子如不經(jīng)常使用規模,應(yīng)每隔45天開機(jī)沖洗15分鐘。

 

 

 

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